細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)問題了應(yīng)該怎么辦

細(xì)胞無法在培養(yǎng)器皿上貼壁生長<o:p></o:p> 1. 細(xì)胞胰酶消化過度：縮短胰酶消化時(shí)刻或削減胰酶用量。<o:p></o:p> 2. 支原體污染：阻隔細(xì)胞，查看是不是傳染支原體；清潔通風(fēng)廚和培育箱，如細(xì)胞被污染，滅菌處理后丟掉。<o:p></o:p> 3. 培育基中無附著因子：如果運(yùn)用的是無血清配方，應(yīng)保證富含附著因子或許運(yùn)用經(jīng)過包被的培育板。<o:p></o:p> 一、細(xì)胞成長緩慢<o:p></o:p> 1. 培育基或血清改變，比較不同培育基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有無區(qū)別；經(jīng)過成長試驗(yàn)對比新老批次血清有無區(qū)別；增大細(xì)胞初始接種密度；使細(xì)胞逐漸習(xí)慣新的培育基。<o:p></o:p> 2. 必需成長推進(jìn)成分（如L-谷氨酰胺或成長因子）耗竭、缺乏或分解：去掉原培育基，參加新鮮培育基；向培育基中增加成長推進(jìn)成分（如L-谷氨酰胺）。<o:p></o:p> 3. 輕度細(xì)菌或真菌污染：在不增加抗生素的條件下進(jìn)行培育，如細(xì)胞被污染，滅菌處理后丟掉。<o:p></o:p> 4. 時(shí)刻存儲(chǔ)不妥：血清應(yīng)于-5℃至-20℃下貯存；培育基應(yīng)于2℃~8℃下避光貯存；盡量削減血清和培育基見光時(shí)刻。<o:p></o:p> 5. 細(xì)胞初始接種密度低：增大活細(xì)胞接種密度。<o:p></o:p> 6. 細(xì)胞變老、老化：將老化細(xì)胞丟掉，取用代數(shù)較少的細(xì)胞。<o:p></o:p> 7. 支原體污染：阻隔細(xì)胞，查看是不是傳染支原體；清潔通風(fēng)廚和培育箱，如細(xì)胞被污染，滅菌處理后丟掉。<o:p></o:p> 二、培育基pH值改變敏捷<o:p></o:p> 1. 培育箱CO2分壓設(shè)置過錯(cuò)：依據(jù)培育基中NaHCO3的濃度增大或下降培育箱CO2的分壓，NaHCO3濃度為2.0-3.7g/L時(shí)，應(yīng)相應(yīng)地運(yùn)用5%-10%的CO2分壓。<o:p></o:p> 2. 細(xì)胞培育瓶瓶蓋過緊：將瓶蓋旋松1/4圈。<o:p></o:p> 3. 碳酸氫鹽緩存體系緩沖才能缺乏：參加HEPES緩沖液，使其終濃度為10-25mM。<o:p></o:p> 4. 培育基中鹽含量不正確：CO2平衡環(huán)境中運(yùn)用以Earle平衡鹽為根底的培育基，大氣條件下運(yùn)用以Hanks平衡鹽為根底的培育基。<o:p></o:p> 5. 細(xì)菌、酵母或真菌污染：將細(xì)胞和培育基滅菌處理后丟掉。<o:p></o:p> 三、細(xì)胞凋亡<o:p></o:p> 1. 培育箱中無CO2：監(jiān)測培育箱中CO2運(yùn)用速度以便斷定及時(shí)更換氣瓶；常常查看管路銜接處是不是漏氣；不要頻頻敞開培育箱門。<o:p></o:p> 2. 培育箱內(nèi)溫度有動(dòng)搖：監(jiān)測培育箱內(nèi)溫度，及時(shí)校對。<o:p></o:p> 3. 運(yùn)用抗生素到達(dá)毒性濃度：削減抗生素的用量；運(yùn)用無血清培育基時(shí)，抗生素濃度應(yīng)下降至1/10。<o:p></o:p> 4. 細(xì)胞復(fù)蘇或凍存時(shí)遭到損害：取用新的細(xì)胞。<o:p></o:p> 5. 培育基的滲透壓不合適：查看徹底培育基的滲透壓。大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞可耐受260~350mOsm/kg的滲透壓，參加某些試劑和藥物后會(huì)影響培育基的滲透壓；昆蟲細(xì)胞培育基的滲透壓（340~380mOsm/kg）要高于哺乳動(dòng)物細(xì)胞。<o:p></o:p> 6. 培育基中毒性代謝商品積蓄：去掉原培育基，換用新鮮培育基。<o:p></o:p> 四、懸浮細(xì)胞集成團(tuán)<o:p></o:p> 1. 存在鈣離子和鎂離子：用不含鈣離子和鎂離子的平衡鹽溶液清潔細(xì)胞，輕輕吹打細(xì)胞，使其構(gòu)成單細(xì)胞懸液。<o:p></o:p> 2. 支原體污染：阻隔細(xì)胞，查看是不是傳染支原體；清潔通風(fēng)廚和培育箱，如細(xì)胞被污染，滅菌處理后丟掉。<o:p></o:p> 3. 蛋白水解酶消化過度導(dǎo)致細(xì)胞裂解、DNA開釋：用0.001%DNA酶I處理細(xì)胞；用PBS沖刷后再接種到新培育基中。<o:p></o:p> 本司產(chǎn)品火熱促銷中，主營產(chǎn)品有elisa試劑盒、血清、細(xì)胞株、規(guī)范品、染色液、培育基、抗體等，我司與各大高校醫(yī)院均有協(xié)作。產(chǎn)品報(bào)價(jià)優(yōu)惠，質(zhì)量保證，產(chǎn)品買的多折扣就多，另有禮物贈(zèng)送，歡迎來電訂貨！本公司產(chǎn)品僅用于科研使用，不供臨床實(shí)驗(yàn)<o:p></o:p>

无码区a∨视频体验区30秒丨久久婷婷五月综合色丁香丨久久综合久中文字幕青草丨精品一卡二卡三卡四卡丨美女又色又爽视频免费

產(chǎn)品分類

細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)問題了應(yīng)該怎么辦