細胞培養在實驗過程中污染的原因

污染是細胞培養的大敵。防備和避免污染是細胞培養成功的關鍵之一。一開端就要十分重視，避免污染，不然會前功盡棄，不只糟蹋時間，并且糟蹋人力、物力，乃至構成無法彌補的丟失。 <o:p></o:p> 細胞培養中常見的生物污染類型有 7 種，分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、b毒污染以及非細胞污染。他們在細胞培養中污染的特色如下：<o:p></o:p>   1. 細菌：細菌在一般倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據感染細菌的不同，可有不同的外形，培養液一般會污濁變黃，對細胞成長影響顯著。<o:p></o:p>   2. 支原體：黑色的，好象多為多形，培養液一般培養液一般會污濁，原體感染，國內血清許多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。并且它不能用過濾的方法除掉。支原體感染細胞今后，細胞病變不很顯著，僅僅漸漸死去。<o:p></o:p>   3. 黑膠蟲：能夠穿透濾膜，也能夠經過空氣傳達，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養液也是不渾的，一般不會太影響，細胞仍是能夠用的。常常是細胞成長狀況杰出，且觀測到的運動物無顯著增多，且培養液顏色、透明度無顯著變化，可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞成長狀況不會有顯著影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除替換血清外無須特別處理。<o:p></o:p>   4. 真菌：一般培養液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開端很像死細胞碎片，僅僅它許多許多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，漸漸的會長出很細的黑色絲狀物。真菌成長的比較慢，不象細菌那么簡單被發現，可是一旦發現有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。<o:p></o:p>   5. 原蟲：培養液可細微污濁，顯微鏡下那些細微的點狀物數量十分多，細微活動，細胞雖然能夠成長但繁衍速度卻顯著減慢，并且細胞狀況欠好，邊際不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞搶奪養分。這種共生是十分遍及的，但他們的數量小，細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常成長，只有當他們抵達必定的數量時就會影響到細胞的成長，終究構成惡性循環。<o:p></o:p>   6. b毒：安排細胞培養過程中，假如沒有除掉潛在的b毒，就會發作b毒污染。現在，從原代猴腎細胞的培養中已發現不少于 20 種血清性b毒。 雖然b毒污染的細胞不影響原代培養，但出產疫苗是不安全的。因而，潛在b毒是細胞大量出產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題<o:p></o:p>   7. 非同種細胞污染 ：便是細胞穿插污染，因為細胞培養操作時各細胞株所需的器件和溶液沒有嚴格分開，往往會使一種細胞被另一種細胞污染。現在，世界上已有幾十種細胞都被 HeLa 細胞所污染，致使許多實驗宣告無效。非細胞培養物所構成的化學成分的污染也偶有發作，大多是因為細胞培養所需物品清洗消毒不完全而帶入一些有毒化學物質所造成的。 <o:p></o:p> 在上述的八種污染物中，黑膠蟲是現代細胞培養中評論比較多的，但大多數文獻未對其進行描繪或一帶而過，就像上面關于描繪黑膠蟲的狀況是不完整，還有許多不明的狀況。<o:p></o:p> 對其身份有多種猜想，到現在都沒有權威地對黑膠蟲進行分類學上的歸類。黑膠蟲究竟是不是一種生物，假如是那黑膠蟲會是何種生物，假如不是，那黑膠蟲會是什么？一系列的問題都懸在斗爭在細胞生物學范疇的學者們的心中。 <o:p></o:p>

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