如何繼續培養已購買的細胞

<p>為防止客戶接納不妥形成細胞逝世。我公司溫馨提示;細胞一般經我司培育兩周復蘇后送與客戶。因細胞是冷凍保存，我司均以冰袋加泡沫箱快遞運輸.客戶在接納細胞產品時，需按以下辦法操作。防止細胞呈現其他問題。<br /> 1. 收到細胞株包裹時，請檢測細胞株冷凍管是否有凍結景象，若有請當即告訴。細胞株請盡速開始培育，或當即冷凍保存(置于&ndash;70 &deg;C，隔夜后，移到液氮)。<br /> 2. 冷凍細胞凍結程序: 2.1. 根據細胞株數據單指定之基礎培育基品種、血清品種和其它指定之成份和份額，制備培育基。絕大多數之細胞均無法當即習慣不同之基礎培育基或不同之血清品種，若因試驗需要，有必要有所不同時，必須以緩慢份額逐步改動培育基組成，斷定細胞習慣后，方進行所需之試驗。 2.2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請必須根據細胞株資料單指定之血清品種培育之。<br /> 3. 將培育基置于37 &deg;C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦洗之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，當即放入37 &deg;C 水槽中快速凍結，水面高度不行挨近或高過冷凍管之蓋沿，不然易發作污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后，以70 % ethanol 擦洗冷凍管外部，移入無菌操作臺內。<br /> 4. 根據細胞品種和濃度，于無菌操作臺內取10 ml 培育基加至T25 或T75 flask中。取出已凍結之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內之培育基，混合均勻，放入37 &deg;C，5 % CO2 培育箱培育。<br /> 5. 對絕大多數細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需馬上由凍結細胞中去除，待第二天斷定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO 靈敏或會形成細胞分解之細胞，需當即去除DMSO 者， 則可將凍結后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培育基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培育基，將細胞均勻混合后，轉移至培育瓶中，再放入37 &deg;C，5 % CO2 培育箱培育。&nbsp;</p>