液相色譜常用柱前衍生化

<p>運用液相色譜最多的是紫外檢測器，為了使一些沒有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外檢測器檢測，往往要經過衍生化反響在這些化合物的分子中引進有強紫外吸收的基團。這些衍生物可被紫外檢測器檢測。<br /> 大多數紫外衍生反響來自經典的廣度剖析和有機定量剖析，新的衍生化反響和衍生試劑隨液相色譜的開展而開展，這些反響的原理都來自有機組成，所以就要求操作者對有機組成有所了解。可是，因為柱前衍生化是為色譜剖析預備樣品，需求衍生處理的樣品的含量水平緩所參與的衍生化反響進程與常量有機組成反響比較有著明顯的不同，而是類似于近年來開展的微量有機組成，紫外衍生化反響要求挑選反響產率高、重復性好的反響。過量試劑和試劑中的雜質如果會干擾下一步的色譜別離和檢測，則在色譜進樣前要進行純化別離。還要留意反響介質對紫外吸收的影響。下面別離介紹一些常用的反響。<br /> (1)苯甲酰化反響 苯甲酰氯及其衍生物一對硝基苯甲酰氯，3，5-二硝基苯甲酰氯和對甲氧摹苯甲酰氯都能夠同胺、醇和酚類化合物反響，生成強紫外吸收的苯甲酸酯類衍生物，過量試劑能夠經過水解除掉，反響產品可用有機溶劑提取后直接進樣。<br /> (2) 2，4-二硝基氟代苯 (DNFB) 的反響 DNFB與醇的反響產率很低，但可與大多數伯胺、仲胺和氨基酸反響，生成強紫外吸收的苯胺類衍生物。<br /> (3) 苯基異硫氰酸酯 (PITC) 的反響 PITC可與氨基酸反響，生成苯基己內酰硫脲衍生物PTH-氨基酸。<br /> 苯基異氰酸酯與醇類反響生成苯基甲酸酯。<br /> (4) 苯基磺酰氯的反響 苯基磺酰氯可與伯胺和仲胺反響。<br /> 甲苯磺酰氯可與多氨基化合物反響，不僅能進步其檢測是敏度，還可改變HPLC的別離度。<br /> (5) 有機酸的酯化反響 有機酸很容易與酰溴基反響生成酯，常用的酰溴基試劑有苯甲酰溴、甲氧基苯甲酰演、對溴基苯甲酰溴和對硝基苯甲酰溴等。酯化反響在極性溶劑(如乙腈、丙酮或四氫呋喃)中進行，有時需加催化劑，如冠醚加鉀離子、三乙胺或N-二異丙基胺等。<br /> (6) 羰基化合物的反響 醛類和酮類中的羰基可與2，4-二硝基苯肼 (DNPH) 反響， 生成苯腙衍生物，反響在弱酸條件下進行。<br /> &nbsp;</p>